熒光定量PCR(Real-Time PCR)技術(shù),即是在PCR反應體系中加入熒光物質(zhì),利用熒光信號積累實(shí)時(shí)監測整個(gè)PCR進(jìn)程,對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。具有應用范圍廣、靈敏度高、操作簡(jiǎn)便、特異性和可靠性更強、自動(dòng)化程度高、無(wú)污染性、具實(shí)時(shí)性和準確性等特點(diǎn)。
一、服務(wù)流程
l 根據基因序列設計特異性的引物和熒光探針
l 從細胞或特定組織中提取總RNA
l 制作標準曲線(xiàn):使用設計合成的引物,以客戶(hù)提供的Total RNA樣品為模板,進(jìn)行Real Time PCR反應,確認引物模板的反應性能。然后將模板進(jìn)行5個(gè)濃度梯度稀釋?zhuān)谱鳂藴是€(xiàn),以供進(jìn)一步定量分析使用
l Real Time PCR反應及定量分析:對客戶(hù)提供的RNA Sample,進(jìn)行Real Time RT-PCR反應,并進(jìn)行定量分析。用相對定量方法進(jìn)行定量分析時(shí),要對管家基因等參比基因進(jìn)行同樣操作,用所得到的值進(jìn)行RNA量的校正,最后求得目的基因的相對表達量
l 提供實(shí)驗報告:包括詳細的實(shí)驗方法及實(shí)時(shí)熒光定量PCR實(shí)驗結果的相關(guān)圖表
二、實(shí)驗周期及價(jià)格
三、交貨內容
完整的實(shí)驗報告,包括實(shí)驗過(guò)程、所用儀器試劑、擴增曲線(xiàn)、標準曲線(xiàn)和相關(guān)分析數據
四、服務(wù)說(shuō)明
l 請提供盡量多的實(shí)驗材料:動(dòng)物細胞數為106以上,動(dòng)物組織為100 mg以上
l 客戶(hù)須在實(shí)驗開(kāi)始前確保其細胞或組織中有目的基因的表達,并提供目的基因的相關(guān)信息(基因名稱(chēng)、序列等信息)
l 客戶(hù)應對所提供的材料及信息負責,如因客戶(hù)提供的材料及信息不準確而引起的實(shí)驗延誤或經(jīng)濟損失由客戶(hù)承擔
l PCR所需引物/探針(如果用探針?lè )ǎ?,可以由您自己提供,也可以委托本公司設計合成(費用另計)。如果由您自己提供,必須是PAGE純化的高質(zhì)量的干粉,本公司不接受已溶解的引物/探針。
服務(wù)承諾:
l 會(huì )在最短的時(shí)間內快速將實(shí)驗完成
保證檢測結果準確、客觀(guān)、可信,但不能確保一定要得到某特定結果。